自從上次“實(shí)測(cè)快速通用型基因組DNA提取試劑盒的性能”文章發(fā)布后，已經(jīng)有很多客戶向我們申請(qǐng)了試用裝，使用的反饋效果也不錯(cuò)。其中某生物科技有限公司更是做了多家試劑盒的測(cè)試對(duì)比，接下來(lái)小新就將該公司測(cè)試的結(jié)果分享給大家，畢竟產(chǎn)品自測(cè)的效果難免讓人懷疑有做廣告的嫌疑，第三方的測(cè)試才會(huì)顯得公平公正。

一、 實(shí)驗(yàn)材料

試劑盒：**贊（DC112-01）、**金（EE101-01）、*根（KG203）、新景（3105005）、*為（CW2298M）

樣本：小鼠肌肉、豬血、大腸桿菌（DH5α）、夾竹桃葉片

二、 實(shí)驗(yàn)方法

1. 樣本處理：

A. 小鼠肌肉：稱取20 mg，液氮研磨成粉；

B. 豬血：取200 μl全血；

C. 大腸桿菌（DH5α）：1.5 ml菌液離心取細(xì)菌沉淀；

D. 夾竹桃葉片：稱取100 mg，液氮研磨成粉。

2. 按照各試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，提取DNA。

3. 用超微量分光光度計(jì)測(cè)量提取的DNA，并進(jìn)行電泳檢測(cè)和Qubit檢測(cè)。

三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1. 超微量分光光度計(jì)測(cè)量結(jié)果如下：

2. 電泳檢測(cè)結(jié)果如下：

3.Qubit檢測(cè)結(jié)果如下：

四、 分析與討論

1. 從超微量分光光度計(jì)測(cè)量結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是**贊，豬血樣本提取效果最好的是**贊，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。

2. 從電泳結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是新景，豬血樣本提取效果最好的是**贊和新景，大腸桿菌樣本提取效果最好的是**贊，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。（*根試劑盒提取的樣本電泳均未顯示條帶，但濃度高的原因是該試劑盒為快速樣品制備試劑盒，樣本裂解處理后DNA已經(jīng)降解成小片段，雖然可以直接用作qPCR檢測(cè)，但電泳已經(jīng)觀察不到DNA條帶。）

3. 從Qubit檢測(cè)結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是**贊，豬血樣本提取效果最好的是新景，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。

4. 三種檢測(cè)結(jié)果的差異性說(shuō)明了分光光度計(jì)檢測(cè)方法的局限性，因?yàn)樽贤馕舛葴y(cè)量不具有選擇性，無(wú)法區(qū)分DNA、RNA或蛋白質(zhì)，同時(shí)一些游離核苷酸或多余的鹽離子也會(huì)影響檢測(cè)的數(shù)值。比如雖然從超微量分光光度計(jì)測(cè)量結(jié)果分析，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，但是電泳的結(jié)果卻是新景和*為的DNA條帶亮度差不多，**贊的DNA條帶反而更亮，并且*為提取的大腸桿菌DNA中污染有RNA。

5. 對(duì)比超微量分光光度計(jì)測(cè)量結(jié)果和Qubit檢測(cè)結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)新景和**金的試劑盒提取的DNA這兩者的檢測(cè)結(jié)果數(shù)值都很接近，差異比**贊和*為的試劑盒要小，說(shuō)明新景和**金的試劑盒提取的DNA純度更高，RNA等雜質(zhì)的含量很少（電泳也能觀察到區(qū)別）。

市場(chǎng)上常見(jiàn)的通用性基因組DNA提取試劑盒（包括**贊、*為等公司）所采用的技術(shù)方案都是模仿QIAGEN的DNeasy Blood & Tissue Kit 產(chǎn)品，簡(jiǎn)而言之就是蛋白酶K消化后加醇過(guò)柱，缺點(diǎn)是去除雜質(zhì)效率比較差，且容易殘留RNA。新景的快速通用型基因組DNA提取試劑盒則采用了全新獨(dú)創(chuàng)的分相后直接過(guò)柱技術(shù)，不僅操作步驟更簡(jiǎn)單，獲得的DNA純度更高，對(duì)復(fù)雜樣本（血液、植物、糞便）也能輕松應(yīng)對(duì)，必定會(huì)在不同廠家的通用型基因組DNA提取試劑盒競(jìng)爭(zhēng)中脫穎而出。